人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测
申艳敏 魏建超 尚书文 牛明福 周玉珍 周斌 曹瑞兵 陈溥言 侯继波 · 2008
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期刊名称:
微生物学通报   2008 年 04 期
摘要:
根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列,选择毕赤酵母偏好密码子,采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-LL-37。pPICZα-A-LL-37经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导分泌LL-37于发酵上清液,其表达量为206mg/L。表达产物...
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