摘要：
采用分子克隆手段从基因组数据库中获得5个可以不对称还原苯丙酮酸合成手性苯乳酸的酮酸还原酶,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。比较5个重组酮酸还原酶的酶活、转化率、ee值等指标,来源于干酪乳杆菌的酮酸还原酶LcKAR表现出最高的比活力和选择性。纯酶LcKAR的比活力为0.32 U/mg,在不对称还原反应中遵循Prelog规则,产物为(R)-苯乳酸,且ee>99%。对重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28a-LcKAR的培养基及发酵条件进行优化,最适培养条件为种龄6 h,接种体积分数为3%...
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