摘要：
目的 探讨运用增强子增强HTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HELA细胞的体外杀伤作用.方法 将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与HTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HELA细胞后用双荧光素酶系统分析其活性差异;然后构建PHR-SCT/CDTKG治疗载体转染HELA细胞,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测融合自杀基因MRNA表达,HPLC检测5-FU浓度,MTT分析载体杀瘤的效果.结果 HELA细胞中增强子能使HTERT启动子活性提高6~13倍,其中SV40-CMV双增强子/HTERT启动子的活性最高,达到CMV增强子/启动子的近3倍;体外转染PHR-SCT/CDTKG后可检测到CDTK的MRNA的表达;细胞上清中5-FU最高浓度为50.83 UG/ML;当5-FC浓度为(3)00UG/ML、GCV浓度为10 UG/ML时,HELA细胞的相对细胞存活率为48.7%.结论 SV40-CMV双增强子联合HTERT启动子能高效靶向的调控CDTK融合自杀基因杀伤宫颈癌细胞,因而是一种很有前景的基因治疗宫颈癌的策略.
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