两种密码子优化的Cas9编码基因在斑马鱼胚胎中基因敲除效率的比较

张峰华王厚鹏黄思雨熊凤朱作言孙永华 · 2016

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CRISPR

期刊名称：

Hereditas 2016 年 002 期

发表日期：

2016

摘要：

为在斑马鱼中获得特异且高效的基因敲除,多个实验室独立人工合成了序列彼此不一的Cas9 c DNA序列,并克隆入不同的体外转录载体.本文选取两种斑马鱼密码子优化的Cas9编码序列(z Cas9_bz和z Cas9_wc),对斑马鱼胚胎中的7个基因(外源egfp及内源chd、hbegfa、th、eef1a1b、tyr、tcf7l1a)分别进行敲除,通过PCR产物测序、克隆测序和表型分析比较了两种Cas9的敲除效率.结果发现,z Cas9_wc在各种情况下都显现出较高的敲除效率,而z Cas9_bz的效率相对较低.