人间隙连接蛋白31相互作用蛋白AnnexinⅡ的筛选与证实

刘宇贺力强谭志平唐程远迟静薇蔡芳潘乾龙志高梁德生邬玲仟戴和平夏昆张灼华夏家辉 · 2005

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间隙连接蛋白31

期刊名称：

生物化学与生物物理进展 2005 年 06 期

发表日期：

2005

摘要：

间隙连接蛋白31(CONNEXIN31,CX31)是间隙连接蛋白(CONNEXIN)家族的一员,目前对于CX31的功能及其调节方式知之甚少.采用固相多肽合成的方法合成CX31羧基端一个多肽片段(250~266),经HPLC纯化后偶联到匙孔蜮血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗CX31的抗体.运用制备的抗CX31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,Q-TOF质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,运用抗体PULL-DOWN实验,筛选到可能相互作用蛋白ANNEXINⅡ,经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实ANNEXINⅡ与CX31相互作用.