一种pH稳定性提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用

饶志明徐美娟杨套伟张显 · 2016

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专利权人：

江南大学

申请人：

江南大学

通讯地址：

214122江苏省无锡市蠡湖大道1800号

专利类型：

发明专利

专利号：

CN105296456A

公开日期：

2016.02.03

摘要：

本发明公开了一种酸性稳定的谷氨酸脱羧酶(GAD)的pH稳定性向中性范围偏移的突变体,属于生物工程领域.将来源于植物乳杆菌GB01-21谷氨酸脱羧酶的谷氨酸脱羧酶编码基因进行定点突变,主要将第89位的谷氨酸E分别突变为精氨酸R或丙氨酸A.谷氨酸脱羧酶突变体分别在pH6.5时的相对酶活由原来的38％提高至72％或84％,在中性pH范围内的酶活稳定性显著提高.以重组大肠杆菌合成的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时,GABA产量达到260g/L,产率为99.6％;而以重组谷氨酸棒杆菌合成的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时,GABA产量达到116g/L,产率为99.5％.本发明减少了发酵设备在酸性条件下的损耗,为高效合成γ-氨基丁酸奠定了基础.