摘要:
一种苦瓜蛋白肠溶片的制备工艺,将种子去壳,然后放入研钵中加入液氮进行研磨;接着使用CTAB法得到全基因组;根据苦瓜蛋白MAP30的基因序列设计相关引物,确定PCR的条件及体系;PCR产物回收后进行TA克隆,导入感受态细胞DH5α,筛选出阳性菌落,培养后进行双酶切;过夜培养PET?28a,提取表达质粒,进行酶切;将经双酶切过后的目标DNA片段和表达质粒片段在solutionⅠ体系下进行过夜连接;接着将其导入BL21(DE)感受态细胞中,筛选出阳性菌落;将阳性菌落放大培养并在IPTG的诱导下进行蛋白的表达;将蛋白进行纯化干燥;得到目标蛋白MAP30将作为主要的有效成分与一系列辅料共同制成有保健功能的苦瓜蛋白肠溶片;本发明的苦瓜片中有效蛋白MAP30的含量高,更能促进人体的健康。