将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法

国前于金明廖湘鲁 · 2016

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专利权人：

山东省肿瘤医院

通讯地址：

250117 山东省济南市槐荫区济兖路440号

专利类型：

发明专利

公开日期：

2016.03.02

摘要：

本发明公开了一种将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法,取待检测的细胞团加入4％的多聚甲醛预固定1-6秒钟,终止固定;将预固定后的细胞团中加入0.2％Triton?X-100?200μl进行细胞打孔5-15分钟;将打孔后的细胞用PBS冲洗后,将冲洗后的细胞中加入电泳缓冲液制成细胞悬液;恒压条件下进行电泳,电泳完成后收集电泳缓冲液,将收集到的电泳缓冲液用70％的乙醇固定,固定22-26h.本发明采用了二次固定的方法,第一次固定时使用4％的多聚甲醛预固定1-6秒钟,使细胞膜的表面蛋白质变性,利于后续的打孔,保证细胞在打孔的过程中不破裂;若不进行第二次固定,细胞在进行后续的检测过程中会出现破裂,保证检测结果的准确性.