嗜热脂肪芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus）来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB转糖苷催化活性改造

董艺凝陈卫陈海琴赵建新陈永泉张灏 · 2020

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β-半乳糖苷酶

期刊名称：

食品与发酵工业 2020 年 02 期

摘要：

本研究以GH42家族嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB为研究对象，针对其转糖苷活性弱的问题，采用定点突变与化学修饰相结合的方法，对其预测亲核催化(Nucleophile)位点Glu303进行了功能研究与分子改造。所得突变体Ox-E303C与野生型酶相比，可将低聚半乳糖(GOS)合成量由0%提高到11.5%。研究结果表明对耐热β-半乳糖苷酶BgaB亲核催化(Nucleophile)位点进行半胱氨酸亚磺酸(-SOO~(—))替换，能够提高其转糖苷催化活性。本研究对GH42家族β-半乳糖苷酶转糖苷催化功能的分子改造具有广泛的参考价值。