基于微滴式和芯片式数字PCR技术的转基因克螟稻成分的定量检测
摘要：
本研究以转基因克螟稻品系为研究对象,通过大米内源蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase,SPS)基因和转基因克螟稻品系特异性序列的绝对拷贝数分析,建立了转基因克螟稻成分的双重数字PCR定量分析方法。本研究中转基因克螟稻定量体系中最适DNA添加量在10pg至13ng之间,模板断裂程度、PCR扩增退火温度等因素对定量结果的影响不大。其定量的绝对灵敏度达1 copies/μL,可在微滴式和芯片式数字PCR平台上准确检测含量在0.1%-100%(质量分数W/W)之间的转基因克螟稻成分,尤其是对含量低于1%的样品,其定量准确性高于传统的实时荧光PCR方法。本研究建立的转基因克螟稻成分定量分析方法适用性较好,可用于转基因水稻规范化与标准化的定量分析。
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