人巨细胞病毒pp65基因重组蛋白在昆虫细胞中的表达与分析

邱红玉胡志红刘岚吴东王华林邓菲孙永玉 · 2004

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重组蛋白质类

昆虫细胞学

巨细胞病毒属

免疫印迹法

期刊名称：

中华传染病杂志 2004 年 05 期

摘要：

目的为了制备人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因疫苗,应用BacToBac系统对HCMVpp65基因进行表达,并对重组蛋白质的特异性及生物活性进行确定。方法通过脂质体法用HCMVpp65基因重组病毒感染Sf9昆虫细胞,并在感染的不同时期收集细胞,用特异性的HCMVpp65MAb对重组蛋白进行Westernblot,并选择HCMVIgG阳性及阴性的孕妇血清与重组蛋白进行免疫印迹反应。结果重组Bacmid大分子DNA直接转染昆虫细胞可得到100%的阳性重组病毒,病毒滴度为3×107pfu/ml,重组病毒...