肺炎链球菌毒力因子PspA的原核表达、纯化及鉴定

胥文春曹炬许颂霄罗进勇阳强尹一兵 · 2007

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肺炎链球菌

PspA

疫苗

期刊名称：

重庆医科大学学报 2007 年 06 期

摘要：

目的:通过构建原核表达载体,获得肺炎链球菌毒力因子PspA重组蛋白。方法:分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将PspA序列克隆到原核表达载体PET-32(a)上,用酶切及测序鉴定。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,进行蛋白纯化,获得的重组蛋白用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果:克隆的DNA序列与GenBank中的数据相符,获得的重组蛋白PspA纯度达到90%。结论:成功表达和纯化了PspA,为肺炎链球菌多肽联合疫苗研制...