铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建
孙飞龙 邱志刚 金敏 郭向飞 王新为 吴道澄 李君文 · 2009
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期刊名称:
生物技术通报   2009 年 第10期 期
摘要:
构建了荧光实时定量PCR标准品以检测水中的铜绿假单胞菌。利用所报道的铜绿假单胞菌gyrA基因为目的基因设计引物,通过培养细胞,煮沸法裂解细胞后做PCR,电泳,胶回收,然后与pMD19-TVector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线,检测水样品中铜绿假单胞菌的菌量。
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