反向表达狂犬病病毒糖蛋白的重组伪狂犬病病毒Bartha-K61株的构建

袁子国张秀香王晓虎徐慧娟张守峰扈荣良 · 2009

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狂犬病病毒

期刊名称：

中国兽医科学 2009 年 03 期

摘要：

为构建以伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株为载体的反向表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(rgp)的重组活载体疫苗,将EGFP-rgp的表达框克隆入p8-AA载体的SphⅠ/NdeⅠ酶切位点处,经酶切鉴定为反向连接,阳性重组子命名为p8AA-EGFP/rgp。在质脂体介导下将该质粒与Bartha-K61共转染PK-15细胞,获得rPRV/EGFP/rgp重组病毒。对纯化后的重组病毒进行RT-PCR、Western-blot和间接免疫荧光鉴定。结果表明,重组病毒的效价(TCID50)为10-8.2...