斑马鱼HAS2基因的克隆、抗体制备及分析

杨建华杨青吴秀山袁婺洲王跃群李永青莫小阳万永奇 · 2010

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HAS2

斑马鱼

原核表达

多克隆抗体

期刊名称：

湖南师范大学自然科学学报 2010 年 03 期

摘要：

HAS2是斑马鱼心脏发育的一个标志基因,为了利用斑马鱼动物模型进一步研究HAS2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼HAS2基因的片段.将所得的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-HAS2)转化大肠杆菌(E.coli)BL21,IPTG诱导表达GST-HAS2融合蛋白;通过尿素洗涤沉淀蛋白并切胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体活性.生物信息学分析结果表明:斑马鱼HAS2基...