斑马鱼心脏标志基因TNC多克隆抗体的制备及表达研究

张湘涛夏机良张义袁婺洲王跃群李永青邓云莫小阳江志钢吴秀山万永奇 · 2010

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TNC

融合蛋白

多克隆抗体

期刊名称：

激光生物学报 2010 年 05 期

摘要：

TNC是心脏发育的标志基因,但该基因在斑马鱼中的表达尚未研究。斑马鱼TNC基因基因的开放阅读框含有5 132 bp,编码1 710个氨基酸,采用生物信息学结合PCR的方法获得了斑马鱼TNC基因的片段。将所得的PCR片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-TNC)转化大肠杆菌BL21;通过IPTG诱导表达GST-TNC融合蛋白,通过尿素洗涤沉淀蛋白并切胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。Western blot和免疫组化分析表明,制备的抗体具有良好的...