靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
毛沛沛
陈宝安
程坚
高峰
丁家华
高冲
孙耘玉
王骏
赵刚
鲍文
宋慧慧
张伟
吴玮玮
夏国华
许文林
王雪梅
· 2010
期刊名称:
中国实验血液学杂志
2010 年
01 期
摘要:
本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BamHI和HindⅢ双酶切线性化的pGCsilencer人U6启动子质粒载体中;为了确定利用酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,采用脂质体转染的方法将构建好的3个重组载体(pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3)导入慢性髓系白血病耐药细胞...