靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
毛沛沛 陈宝安 程坚 高峰 丁家华 高冲 孙耘玉 王骏 赵刚 鲍文 宋慧慧 张伟 吴玮玮 夏国华 许文林 王雪梅 · 2010
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期刊名称:
中国实验血液学杂志   2010 年 01 期
摘要:
本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BamHI和HindⅢ双酶切线性化的pGCsilencer人U6启动子质粒载体中;为了确定利用酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,采用脂质体转染的方法将构建好的3个重组载体(pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3)导入慢性髓系白血病耐药细胞...
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