蜂毒肽融合蛋白在裂殖酵母中的表达研究

胡宗利刘志昭邓磊潘宇陈国平 · 2010

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蜂毒肽

裂殖酵母

蛋白表达

GST亲和层析

期刊名称：

药物生物技术 2010 年 01 期

摘要：

将抗菌肽之一的蜂毒溶血肽(Melittin)基因序列定向克隆到表达载体pESP-2中,构建GST-Melittin融合蛋白。利用载体上严格受硫胺素浓度调控的启动子Pnmtl,采用先扩大培养后诱导表达的两步培养法,实现了融合蛋白在裂殖酵母Schizosaccharomyces Pombe中的异源表达。然后通过GST亲和层析法一步纯化得到融合肽。研究中1L培养液收集到约5g鲜活酵母菌,纯化得到400μg融合蛋白,融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot验证,表明蜂毒肽融合蛋白已在裂殖酵母中高...