柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗的构建及其免疫保护性研究
李运娜
黄金贵
李建华
宫鹏涛
田甜
李赫
杨举
张国才
陈玉江
张西臣
· 2012
期刊名称:
中国病原生物学杂志
2012 年
02 期
摘要:
目的构建鸡柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗并研究其免疫保护性。方法应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫ADF基因完整开放阅读框,克隆至pMD18-T载体中;分别用限制性内切酶PstⅠ/ClaⅠ和PvuⅡ/ClaⅠ进行双酶切,ADF目的基因克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV261-ADF和pMV361-ADF,重组质粒电穿孔转化卡介苗。将构建的重组卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF疫苗通过滴鼻、口服、颈部皮下注射3种途径...