利用荧光PCR技术对Crispr/Cas9敲除microRNA 505的小鼠进行鉴定
仝莉
王茂春
李雨
李凯
周宇荀
肖君华
金力
· 2016
期刊名称：
生命科学研究
2016 年
第20卷 卷
第4期 期
摘要：
利用荧光PCR技术对Crispr/Cas9系统敲除的micro RNA 505小鼠进行鉴定,能快速检测出敲除小鼠的基因型,有效加快敲除小鼠基因功能验证的进程。首先,在Crispr/Cas9系统敲除的基因位点区域设计PCR引物,并在上游引物的5′端使用羟基荧光素(5-carboxyfluorescein,FAM)荧光修饰。模板经过PCR的扩增后,将PCR产物与已知片段大小的6-羧基-X-罗丹明琥珀酰亚胺酯(6-carboxy-X-rhodamine,ROX)混合,在377测序仪上通过聚丙烯酰胺凝胶电泳...
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