新霉素免疫亲和柱的制备及其性能鉴定

郑琦曹立民郑洪伟林洪隋建新 · 2016

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新霉素

免疫亲和柱

高效液相色谱法

期刊名称：

食品安全质量检测学报 2016 年 03 期

摘要：

目的制备新霉素多克隆抗体免疫亲和柱并鉴定其性能。方法将经过蛋白A柱纯化的新霉素多克隆抗体,非定向偶联于sepharose 4B琼脂糖凝胶,间接竞争ELISA方法检测抗体特异性、亲和常数及纯化前后效价;通过考马斯亮蓝法测定偶联前后蛋白浓度计算偶联率,高效液相色谱方法(HPLC)筛选亲和柱最优洗脱剂;将免疫亲和萃取技术与HPLC以离线方式联用测定南美白对虾中的新霉素。结果抗体纯化后效价提高5.67倍,亲和常数为2.02×10~8 L/mol;在4℃、6 h条件下可实现充分偶联;HPLC法筛选亲和柱最优洗...