原生质体介导马尔尼菲青霉基因转化体系的优化

陈春梅冯姣陈志文肖星蒋敏敏史茗岚贺莉雅蔡文莹席丽艳李希清 · 2016

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马尔尼菲青霉

原生质体

转化

期刊名称：

中国真菌学杂志 2016 年 03 期

摘要：

目的优化原生质体介导的马尔尼菲青霉转化体系,为其基因功能研究提供良好的平台。方法通过原生质体介导将构巢曲霉(Aspergillus nidulans)pyrG基因插入马尔尼菲青霉尿嘧啶缺陷株ligD(pyrG-,ligD-)中,在不含尿嘧啶的培养基中筛选阳性转化子,运用PCR验证重组子,通过改变影响转化效率的酶解时间、培养基浓度、质粒浓度、不同配方的原生质体洗涤液STC和不同配方的原生质体助融剂PTC 5个条件对体系进行优化。结果 PCR验证A.nidulans pyrG基因成功的插入ligD中,转...