基于Tet-On 3G的IFITM3诱导表达MDCK细胞系的建立及功能分析
曹婷婷
杜寿文
许汪
邢彬
赵飞
王茂鹏
朱羿龙
白杰英
田宇飞
刘立明
赵翠青
周义发
李昌
金宁一
· 2017
期刊名称:
高等学校化学学报
2017 年
05 期
摘要:
利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFITM3~+细胞百分数及定位分析.用含萤光素酶(Luciferase)报告基因的禽流感病毒H5/H7蛋白或VSV G蛋白包裹的假型慢病毒颗粒进行感染实验,检测萤光素酶活性.结果表明,筛选获得了携带人IFITM3的MDCK诱...