基孔肯雅病毒病毒样颗粒的制备及初步鉴定

陈何嵩程林峰马宏炜叶伟韩佩君张亮雷迎峰张芳琳 · 2017

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基孔肯雅病毒

杆状病毒表达系统

病毒样颗粒

期刊名称：

热带医学杂志 2017 年 03 期

摘要：

目的通过杆状病毒表达系统表达制备基孔肯雅病毒(CHIKV)病毒样颗粒并进行初步鉴定。方法首先将基孔肯雅病毒的结构蛋白基因C-E3-E2-6K-E1克隆入p Fast-Bac~(TM) Dual转移载体中并鉴定;然后将构建正确的重组转移载体转化DH10Bac感受态细胞后提取重组杆粒并鉴定;再将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞后获得重组杆状病毒,并利用免疫荧光法(IFA)鉴定其感染Sf9细胞后E2蛋白的表达;最后通过透射电镜(TEM)和Western-Blot鉴定CHIKV病毒样颗粒。结果成功获得了含有CHI...