唾液外泌体的制备方法及其在分子诊断中的应用
肖华 孙妍 夏志军 尚志 孙凯博 曹成喜 樊柳荫 · 2016
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专利权人:
上海交通大学
申请人:
上海交通大学
通讯地址:
上海交通大学
专利类型:
发明专利
专利号:
CN105675774A
摘要:
本发明公开了一种唾液外泌体的制备方法及其在分子诊断中的应用;包括以下步骤:从唾液样品中去除高丰度蛋白,滤去黏蛋白,分离提取外泌体,对所得外泌体进行表征,提取外泌体蛋白,对蛋白进行鉴定,并应用与肺癌生物标志物的发现。目前尚没有规范化的唾液外泌体制备技术,现有制备技术存在高丰度蛋白干扰和背景杂质干扰,导致外泌体回收率低、鉴定蛋白少等不足,难以反映真实的外泌体蛋白组学信息。本发明以成人健康志愿者和肺癌患者的唾液为样本,采用亲和层析色谱和膜分离结合技术,在去除了唾液的高丰度蛋白和黏蛋白后,通过离心提取唾液中的外泌体,并对其蛋白组进行分析,鉴定到了更多的外泌体蛋白。
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