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一种特异性靶向QKI基因的sgRNA及其应用
郑良荣
赵文婷
孙泽玮
· 2016
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阅读量:113
专利权人:
浙江大学
申请人:
浙江大学
通讯地址:
310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号
专利类型:
发明专利
专利号:
201610108864.4
公开日期:
2016.05.11
摘要:
本发明提供制备特异性靶向目标基因QKI的sgRNA,其序列如SEQIDNO.1所示。利用本发明提供的sgRNA,合成双链sgRNA寡聚核苷酸,将sgRNA构建至pSpCas9(BB)-2A-Puro载体,鉴定并扩增,转染HEK293T细胞获得QKI基因敲除细胞。本发明能够在较短时间内精确靶向人QKI基因并且实现基因敲除,免去了购买QKI基因敲除小鼠分离原代细胞的复杂操作,且价格低廉,有助于进一步深入研究QKI的生物学功能。本发明方法步骤简单、sgRNA靶向性好,QKI基因敲除效率高。
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