棉铃虫单核衣壳核多角体病毒几丁质酶基因的克隆与表达
吴东
王华林
邓菲
陈新文
彭辉银
胡志红
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摘要：
根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HASNPV)几丁质酶基因的序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出不含N末端信号肽以及C末端内质网定位肽的几丁质酶基因片段.将该基因片断克隆至原核表达载体PPROEXHTB,经IPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中获得了高效表达,表达产物的大小为60KD,含量占菌体总蛋白量的40%.利用来源于ACMNPV 几丁质酶的抗体对表达蛋白进行检测,获得特异性的显色信号,证实所获原核表达产物与杆状病毒的几丁质酶具有同源性.
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